Adecuación y validación de un método analítico para la determinación de oxitocina en inyectables por cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa (RP-HPLC) con detección de diodos

Abstract

Se describe la adecuación y validación de un método analítico para la determinación de oxitocina en inyectables,utilizando cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa con detección ultravioleta de diodos. La literaturaoficial reporta un método RP-HPLC en modo gradiente. Se realizaron modificaciones con la finalidad de obtener unametodología por cromatografía en fase reversa en modo isocrático utilizando una columna C18 Spherisorb® 5μ ODS4,6 mm x 150 mm, fase móvil constituida por una solución A de fosfato monosódico 0,1 M pH 4,5 y una solución Bacetonitrilo:agua (1:1) en una proporción A:B (60:40), longitud de onda de detección de 220 nm y velocidad de flujode 2,5 mL/min. La validación se realizó siguiendo los parámetros establecidos por la Farmacopea Americana y elComité Internacional de Armonización (ICH). Los parámetros evaluados fueron precisión del sistema y del método,adecuación del sistema, linealidad y rango, selectividad, límite de detección y exactitud. Para la calibración se obtuvoun valor de y = 5,44x105X + 4,23x103 y r = 0,9997 en un rango comprendido entre 0,69UI y 3,22 UI de oxitocina.Se reporta la adecuación de sistema en términos de tiempo de retención (TR), área (A), factor de cola (T), factor deca pacidad (k’), ancho del pico al 5% de la altura y número de platos teóricos (N) así como las desviaciones estándarrelativas (DSR) correspondientes: TR = 2,617 ± 1,707; A = 1.138.213 ± 2,97; T = 1,063 ± 0,759; K