Método modificado de obtención de ADN genómico en orquídeas (Cattleya spp.) para amplificación con marcadores moleculares.

Abstract

Dado que la eficacia de los distintos protocolos existentes para aislar ADN en cantidad y calidad suficiente puede diferir según el cultivo, es necesario estandarizar los métodos de extracción para garantizar su sencillez y efectividad. El objetivo de este trabajo fue comparar la efectividad de la obtención de ADN genómico mediante cuatro protocolos de extracción, con el fin de seleccionar el método más apropiado a usar en el análisis del potencial genético de especies de orquídeas, a través de marcadores moleculares. El método propuesto consistió en modificaciones al protocolo de Risterucci et al. (2000) y se logró obtener ADN de calidad, cantidad (106,5 ng.μL-1), estabilidad del 83,3% y valores promedio de absorbancia A260/A280 de 1,89. Se detectaron diferencias significativas (P<0,05) para los valores promedios cuantificados del ADN en los métodos. El método propuesto ofrece ventajas sobre los otros protocolos, principalmente debido al reducido número de pasos para la obtención de ADN, facilidad de ejecución y, en especial, su alta estabilidad, lo cual le favorece en aquellos casos en que se requiera procesar muchas muestras simultáneamente, minimizando las posibilidades de contaminación accidental.