Efecto del Péptido Natriurético tipo C sobre Osteoblastos de ratas neonatales en presencia de Lipopolisacárido de E.coli serotipo 026:B6.

Abstract

El efecto del péptido natriurético tipo C (CNP) sobre la proliferación de células osteoblásticas de rata neonatales en cultivo en presencia del Lipopolisácarido (LPS) fue estudiado como una manera de aproximación para entender los mecanismos moleculares y celulares que puedan existir en los osteoblastos expuestos a infecciones bacterianas o a el LPS. En este modelo biológico, la proliferación fue evaluada utilizando el método MTS-PMS. Además, los cultivos de osteoblastos fueron caracterizados por su morfología mediante tinción de H/E y su función mediante la determinación de un marcador especifico del osteoblasto como es la fosfatasa alcalina (FA). También se utilizó el rojo de alizarina para determinar de manera cualitativa y cuantitativa, el proceso de osificación como la deposición de hidroxiapatita (HP). La proliferación, la expresión de la FA y la deposición de HP fueron incrementadas por el suero fetal bovino (SFB) y de manera más significativa e importante por el CNP. Además, estos osteoblastos respondieron al LPS y a las interleuquinas pro-inflamatorias como la IL-6 y el TNF-α produciendo una inhibición significativa de la proliferación, la FA y de la deposición de HP.Adicionalmente se demostró la existencia del NPR-GC-B. Los osteoblastos expuestos de manera simultanea con CNP y LPS, se encontró que el LPS inhibió de manera significativa, todos los parametros estimulados por el CNP. Además, el LPS inhibió completamente la actividad de la NPR-GC-B, lo cual es un hallazgo original. Este trabajo experimental permitió entender los mecanismos fisiopatológicos a nivel molecular y celular asociados a las patologías como son los aflojamientos asépticos de los implantes utilizados en la cirugía traumatológica.