Avances en la transgénesis de plátano (Musa AAB cv. Hartón): Transformación para resistencia al herbicida BASTA

Abstract

En Venezuela, el plátano cv. Hartón, es uno de los rubros más importantes socio económicamente. Para obtener una mayor rentabilidad del cultivo, es necesario entre otros aspectos, desarrollar un eficiente método de control de malezas. En la presente investigación se establecen los parámetros para obtener plantas resistentes al herbicida BASTA. Para ello, se estableció el siguiente protocolo: aislamiento de meristemas e incubación en medio Murashige y Skoog por 3 días en oscuridad, pretratamiento con tres lavados de 1 hora en buffer a pH 7,6; incubación en buffer pH 7,6 con el plásmido pCAMBIA 3201; aplicación de una descarga de 200 V cm-1 desde un capacitor de 1000 μF . Este protocolo asegura mayor eficiencia en la electroporación, menor tiempo de recuperación del tejido y mayor porcentaje de regeneración de plantas. La incorporación del plásmido se evidencia mediante el gen reportero de la bglucuronidasa (GUS). La concentración mínima inhibitoria del herbicida BASTA fue la de 1 mg.ml-1. Harton plantain represents one of the most socio- economically important crops in Venezuela. In order to improve the crop profitability, it is necessary, among other things, to develop an efficient weed control method. In this research suitable parameters to obtain BASTA (herbicide) resistant plants are established. Meristems were isolated and incubated in the Murashige and Skoog culture medium for 3 days under dark conditions, the tissue was pretreated with three hourly washes using buffer at pH 7, 6, and then it was incubated along with plasmid pCAMBIA 3201 on the same buffer. Electroporation was performed applying 200 V/cm/cm-1 discharged from a 1000μF capacitor. This protocol ensures high electroporation efficiency, less tissue recuperation time and greater percent of regenerated plants. Plasmid incorporation was traced using GUS as reporter gene. The minimal inhibitory concentration of BASTA was 1 mg.ml-1.