Los Fosfoinositidos como señalización de las Endotelinas en la eminencia media y el órgano subfornical de la Rata

Abstract

La endotelina-1 es un péptido derivado del endotelio con potentes efectos vasoconstrictores. Existen tres isoformas de endotelinas (ETs): ET-1, ET-2 y ET-3 que actúan en receptores designados como ETA y ETB. Se ha demostrado que la administración central de los isopéptidos de ETs produce efectos autonómicos y cerebrovasculares, lo que sugiere la existencia de un papel clave para las ETs en el SNC. Las endotelinas son capaces de activar diferentes sistemas de segundos mensajeros. Se ha descrito que los receptores de ETs en el SNC están acoplados a la activación de la fosfolipasa C y el subsecuente incremento de los niveles de trifosfato de inositol (IP3). Consistente con la presencia de una alta densidad de receptores específicos para las ETs en el órgano subfornical (OSF) y la eminencia media (EM) del cerebro de la rata, nuestros resultados muestran que el incremento en la hidrólisis de fosfoinosítidos (PI) de membrana inducido por las ET-1 y ET-3 en el OSF y la EM, es dependiente de la dosis y muestra valores de DE50 similares, lo que sugiere que este efecto es mediado por el subtipo de receptor ETB. Se caracterizaron los receptores que median dicho efecto, mediante el uso de agonistas y antagonistas selectivos de ambos subtipos de receptores. El BQ 123 y BQ 610, antagonistas selectivos del receptor ETA, no afectaron significativamente el incremento en el recambio de inositoles de membrana inducidos por las ETs en las estructuras cerebrales. Mientras que el IRL 1620, un agonista selectivo del subtipo de receptor ETB, incrementó la acumulación de InsP1 en el OSF y la EM de modo comparable al producido por las endotelinas, siendo este efecto bloqueado por el BQ 788, un antagonista selectivo de este subtipo de receptor. Nuestros hallazgos demuestran que el receptor ETB media el incremento del recambio de fosfoinosítidos inducido por la ET-1 y la ET-3 en el OSF y la EM del cerebro de la rata.

ABSTRACT
Endothelin-1 is an endothelium derived peptide with potent vasoconstrictor effects. There are three endothelin (ETs) isoforms: ET-1, ET-2 and ET-3 which have the capacity to bind to two receptor subtypes designated as ETA and ETB. It has been demonstrated that central administration of endothelin isoforms induces autonomic and cerebrovascular actions, which suggest a key role for these peptides in the SNC. Endothelins are able to activate different second messengers systems. It has been shown that the ETs receptors in the SNC are coupled to the activation of the phospholipase C and the subsequent increase of inositol trisphosphate (IP3) levels. Consistent with the presence of a high density receptors in the subfornical organ (SFO) and the median eminence (ME) of the rat brain, our results show an increase in phosphoinositides (PI) hydrolysis induced by endothelins in the SFO and ME, in a dose-dependent manner and with similar ED50 values, suggesting that this effect is mediated by the ETB receptor. The receptor mediating this effect was further characterized, with the use of selective agonists and antagonists of both receptor subtypes. BQ 123 and BQ 610, two selective antagonists of ETA receptor, did not altered the ETs-induced increase in the PI turnover. Meanwhile, IRL 1620, a selective agonist of the ETB receptor subtype, increased the InsP1 accumulation in the SFO and the ME in a similar degree as endothelins, and this effect was completely blocked by BQ 788, a selective antagonist of this receptor subtype. Our results demonstrate that in t e SFO and the ME of the rat brain, ET-1- and ET-3-induced phosphoinositides turnover in mediated through the ETB receptor.