Ensayos de quimiotaxis in vitro en Leishmania sp. evaluación de la técnica de los capilares-dos cámaras en promastigotes

Resumen

la respuesta quimiotáctica es un fenómeno que ocurre a lo largo de todo el ciclo de vida de la Leishmania braziliensis,incluyendo la infección activa. El presente trabajo se revisan los métodos utilizados hasta el momento paraevaluar quimiotaxis in vitro en Leishmania sp. Adicionalmente, se describe la adaptación del «ensayo de los capilares-dos cámaras» al estudio de los fenómenos de quimiotaxis en Leishmania. para ello, se estandarizaron parámetrosfundamentales como la densidad celular en la cámara externa, el tiempo de incubación, el rango de concentracionesde los agentes quimiotácticos y la osmolalidad de las soluciones empleadas. para validar la metodología seusaron gradientes químicos de dos monosacáridos, la D-glucosa y la D-fructosa cuyas propiedades quimiotácticashan sido descritas para Leishmania. los resultados sugieren que el «ensayo de los capilares, dos cámaras» constituyeun método de detección confiable, cuantitativo, reproducible y sencillo de la quimiotaxis en Leishmania. Adi cio -nalmente, confirman que las hexosas ensayadas, inducen una respuesta quimiotáctica positiva sobre los parásitos,proporcional al incremento de concentración de las mismas. Finalmente, demuestran que el tiempo de incubación yla osmolalidad de las soluciones empleadas determinan la capacidad migratoria de los parásitos. Esta optimizacióngarantiza la reproducibilidad y la validez de este método como una técnica útil para la evaluación cuantitativa de laquimiotaxis en Leishmania.