Desarrollo y evaluación de un método alternativo para la determinación de resistencia genotípica a drogas antirretrovirales en pacientes venezolanos VIH-1 positivos

Abstract

El VIH-1 es el agente etiológico causante del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA); veinticinco años después de su aislamiento se considera que la infección por este virus ha pasado de una condición fatal a una enfermedad crónica clínicamente manejable. Sin embargo, la aparición y transmisión de cepas resistentes a los diferentes esquemas de tratamientos antirretrovirales (TAR) representa un problema en la consecución de terapias asertivas que mejoren la calidad de vida de los pacientes. La aplicación de métodos de genotipificación basados en estuches comerciales eleva aún más el costoso tratamiento para VIH-1, por lo que es necesario contar con un método alternativo que sea más asequible al médico tratante y al paciente para detectar mutaciones que confieran resistencia en las etapas iniciales del TAR, e inclusive antes de su aplicación, pudiendo prevenir así las fallas terapéuticas. El objetivo del presente estudio fue desarrollar, normalizar y evaluar un método para la determinación de resistencia genotípica a drogas antirretrovirales (DARV) en pacientes venezolanos VIH-1+. La técnica PCR MedPol permitió detectar la presencia de mutaciones que causan tanto resistencia primaria, como resistencia secundaria a las principales DARV suministradas en el país, de manera relativamente rápida y sencilla, simplificando el diagnóstico a través de una sola PCR, por lo que representa una alternativa más económica que los métodos comerciales. La evaluación del método normalizado se llevó a cabo en una población de 171 pacientes venezolanos VIH-1+, principalmente de la región del Distrito Capital. 63 de ellos nunca habían recibido TAR (pacientes no tratados) y 108 habían recibido o estaban bajo algún esquema de TAR al menos una vez desde el diagnóstico inicial de la infección (pacientes tratados). La población fue principalmente de sexo masculino, con una edad promedio de 36 años y el entorno de transmisión predominante fue hombres que tienen sexo con otros hombres (HSH). El 38 % (24/63) de la población no tratada presentó mutaciones relacionadas a DARV, el 11 % (7/63) mutaciones que confieren resistencia primaria al menos a una DARV y el 16 % (10/63) mutaciones secundarias a Inhibidores de la Proteasa (IP). De los 7 pacientes que exhibieron mutaciones que confieren resistencia primaria, 3 las presentaron a Inhibidores Nucleósidos de la Transcriptasa Reversa (INTR), 3 a Inhibidores No Nucleósidos de la TR (INNTR) y 1 a IP. La prevalencia de mutaciones que confieren resistencia primaria a DARV de los pacientes no tratados sugirió la transmisión de cepas resistentes en la epidemia local. Futuros estudios permitirían establecer el costo-beneficio de implantar un programa de vigilancia y determinación de resistencia genotípica en este tipo de pacientes, para lograr la detección temprana de mutaciones que confieren resistencia primaria y establecer TAR asertivos en las etapas iniciales de la infección. La distribución de mutaciones relacionadas a DARV en la población de pacientes tratados fue: 76 % (82/108) mutaciones que confieren algún tipo de resistencia, 50 % (54/108) mutaciones primarias que confieren resistencia a IP, 65 % (70/108) a INTR y 39 % (42/108) a INNTR. El 69 % (75/108) presentó mutaciones secundarias a IP. El 33 % (36/108) mostró mutaciones que confieren resistencia a INTR e INNTR y el 18 % (19/108) mutaciones que confieren resistencia a los tres tipos de inhibidores. Estos datos enfatizaron la importancia del uso racional de las DARV y sugirieron la necesidad de una adecuada información e instrucción al paciente para el seguimiento del TAR. El análisis filogenético confirmó que el subtipo del VIH-1 circulante en aislados de poblaciones venezolanas fue el B (100%, 171/171), indicando la presencia de una epidemia local estable que permitiría realizar estudios más amplios de subtipificación viral y prevalencia de resistencia genotípica a DARV, a fin de obtener un mejor conocimiento de las características específicas de la infección por VIH en nuestro entorno.