Determinación de los genotipos del polimorfismo rs4986791 del gen TLR4 y su correlación con los genotipos de los polimorfismos rs429358 Y rs7412 del gen APOE en pacientes con enfermedad de Alzheimer de inicio tardío

Abstract

Resumen La enfermedad de Alzheimer (EA) es una patología neurodegenerativa, cuyas características histopatológicas son la acumulación extracelular de agregados de péptido β amiloide (Aβ) y la acumulación intracelular de ovillos neurofibrilares. A pesar de que los mecanismos responsables de la manifestación de la enfermedad no han sido dilucidados, recientemente se formó un consenso en que la inflamación juega un papel importante. En el sistema nervioso central, los mecanismos de inflamación son llevados a cabo principalmente por las microglías, las cuales median la inflamación a través de moléculas asociadas a daño celular o receptores capaces de reconocer moléculas asociadas a patógenos (TLRs). Varios estudios sugieren que el TLR4 participa en la patología de la EA, bien sea ayudando en la remoción de los depósitos del Aβ, o bien promoviendo la neurodegeneración por la liberación de moléculas citotóxicas debido a respuestas inflamatorias exacerbadas. Se han identificado varios polimorfismos de un solo nucleótido en el gen TLR4, generando dos de ellos un cambio no sinónimo en la secuencia de aminoácidos: +896A/G (rs4986790) y +1196C/T (rs4986791). Estos polimorfismos han sido asociados con susceptibilidad a diversas enfermedades asociadas con la edad. Cabe destacar, que uno de los factores genéticos de susceptibilidad a desarrollar la EA de inicio tardío es la presencia del alelo ε4 del gen de la apolipoproteína E (APOE), el cual codifica la isoforma apoE4. La apolipoproteína E se une ávidamente y de una manera isoforma específica al péptido Aβ, un componente importante de la placa senil en la EA. Esta interacción es dependiente del arreglo del βA en una conformación de lámina β, promoviendo la formación y agregación de las fibras de Aβ. Fundamentados en que la asociación del alelo ε4 del gen APOE con el desarrollo de la EA de aparición tardía es una de las más fuertes y que diferentes estudios han propuesto que TLR4 participa en la patología de esta enfermedad nos planteamos el siguiente objetivo: Estudiar el polimorfismo rs4986791 del gen TLR4 y su correlación con los polimorfismos rs429358 y rs7412 del gen APOE en pacientes con enfermedad de Alzheimer de inicio tardío. Para alcanzar dicho objetivo se analizó el ADN, obtenido de muestras de sangre periférica, de 61 pacientes con EA (casos) y 102 individuos aparentemente sanos (controles) genotipificados para los polimorfismos rs429358 y rs7412 del gen APOE. El polimorfismo rs4986791 del gen TLR4 se determinó mediante PCR-SSP (iniciadores de secuencias específicas). Las frecuencias se estimaron por conteo directo, las diferencias entre los grupos se evaluó por la prueba exacta de Fisher. Al establecer comparaciones entre los grupos, no se observó asociación entre la enfermedad de Alzheimer de inicio tardío y el polimorfismo rs429358 del gen TLR4 (p = 0,0007; OR = 0,35). Sin embargo, se confirmó que el alelo ε4 del gen APOE está asociado con el desarrollo de la EA de inicio tardío. Palabras claves: TLR4, Alzheimer, apolipoproteína E, polimorfismo, SSP-PCR,