Estudio del tráfico celular endocítico en eritrocitos infectados por Plasmodium Berghei

Abstract

Resumen La malaria o paludismo es una enfermedad que representa un grave problema de salúd pública a nivel mundial, debido a su alta mortalidad. Es causada por parásitos protozoarios apicomplexa del género Plasmodium. La fisiopatología de esta enfermedad radica en el desarrollo asexual eritrocítico del parásito, durante el cual, Plasmodium altera considerablemente la fisiología del eritrocito parasitado (EP), introduciendo una variedad de cambios estructurales asociados, entre otras funciones, al transporte de moléculas entre parásito y membrana plasmática del EP. Estos cambios han sido ampliamente descritos como nuevos organelos involucrados en el tráfico secretorio, pero poco es conocido sobre el papel que juegan en la incorporación de elementos del medio extracelular. En este trabajo se estudió el tráfico endocítico de EP por Plasmodiumen el modelo murino de Plasmodium berghei. Se utilizaron sondas clásica de marcación fluorescentes de organelos de endocitosis y análisis mediante microscopía de fluorescencia convencional durante la esquizogonia eritrocítica, en ausencia y presencia de D-threo-PPMP, un inhibidor clásico de la biosíntesis de esfingolípidos. El uso de la sonda fluorescentes, por su especificidad, rápida acumulación y bajo nivel de toxicidad, nos permitió identificar en tiempo real la morfología, ubicación y distribución de organelos de tráfico endocítico durante el desarrollo intraeritrocítico del parásito. Una prueba de tratamiento de la tinción rastreador rojo de lisosomas con NH4Cl, un disipador de gradiente de pH y Ca, permitió sugerir la presencia de acidocalcisomas en el citoplasma de P. berghei. La red de membranas túbulo-vesiculares, emplazada por el parásito en el citoplasma del EP, presentó funciones de endocitosis. Todos los organelos de endocitosis. Todos los organelos de endocitosis detectados aumentaron en número y tamaño con el desarrollo del parásito, alcanzando su máxima expresión en el estadio de trofozoito maduro. El tratamiento in vitro con D-threo-PPMP, alteró considerablemente la organización y tinción de casi todos los organelos, lo que sugiere la importancia de los esfingolípidos para su ensamblaje y funcionamiento.