Caracterización de focos endémicos de leishmaniasis visceral en el Estado Carabobo, Venezuela, a través de estudios eco-epidemiológico y molecular

Abstract

La Leishmaniasis visceral (LV), es una protozoosis metaxénica, de amplia distribución mundial, propia de zonas tropicales y subtropicales. Es causada por parásitos pertenecientes a la Familia Trypanosomatidae género Leishmania, considerada un problema de salud pública, a nivel mundial estimándose una incidencia anual de 500.000 casos. En el estado Carabobo, son pocos los estudios realizados que contribuyan a actualizar la prevalencia de la LV en los focos endémicos, conociéndose poco sobre el parásito circulante, así como los factores de riesgo a la infección por Leishmania infantum (sin. L. chagasi). Esto ha traído como consecuencia el descuido en la vigilancia epidemiológica, la desestimación de la enfermedad a nivel asistencial y falta de diagnóstico precoz, lo cual en algunos casos puede ser fatal para el paciente, especialmente en niños, por lo que en el presente trabajo se propuso caracterizar focos endémicos de LV en el estado Carabobo, mediante estudios epidemiológicos y moleculares. El área en estudio correspondió 7 comunidades: Brisas del Mar de Patanemo, Municipio Puerto Cabello, La Clavellina y Las Canchas de Trincheras, Municipio Naguanagua, Barrio Ojo de Agua y Barrio Bolivariano II de Vigirima, Municipio Guacara, Barrio Verdun II, de Municipio Carlos Arvelo y Barrio Altos de Magallanes del Municipio San Diego, de donde procedieron los ocho casos humanos de LV en el Estado Carabobo diagnosticados en el Laboratorio de Leishmaniasis de la UC, cuyos parásitos fueron aislados y mantenidos en hámster. Luego de cumplir con todos los aspectos bioéticos, se realizó una encuesta epidemiológica, se obtuvo muestra sanguínea de humanos y caninos que cohabitaban a 200 m alrededor de la vivienda del caso índice. Para determinar prevalencia se aplicó leishmanina a los humanos y ELISA-rk39, tanto a los sueros ix humanos como de caninos. Se estandarizó PCR-ITS1 para diagnóstico molecular y posteriormente RFLP para la caracterización de los aislados parasitarios. Las comunidades evaluadas se caracterizan por presentar un bajo nivel socioeconómico. Se determinó una prevalencia global de infección por Leishmania sp. en humanos de 16,4 %. Y en caninos una seroprevalencia de 7,8 %. La edad fue el único factor asociado al riesgo en todos los sectores, determinándose los mayores de 30 años los más afectados. La técnica PCR-ITS1 para el diagnóstico molecular de infección por Leishmania sp. utilizando concentraciones diferentes a las sugeridas en el protocolo original. Se determinó la sensibilidad analítica de 5 fg de ADN de Leishmania sp. Se demostró la especificidad de la técnica PCR-ITS1 para el diagnóstico de Leishmaniasis, al no amplificar ADN de T. cruzi, T. rangeli, T. gondii, ni ADN de humano ni de canino. La técnica de PCR-ITS1 permitió detectar infección en muestras de individuos que resultaron negativos por IDR, igualmente detectó un alto porcentaje (67%) de infección en caninos contrastando con el porcentaje detectado (7,8%) mediante ELISA –rk39. Los patrones del polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción revelaron que en los aislados de los sectores: Altos de Magallanes y Bolivariano II y uno de los aislados de Brisas del Mar, coinciden con el patrón de Leishmania infantum. Los aislados de Canchas y las Clavellinas se observó patrones compatibles con L. mexicana. Un aislado de Brisas del Mar, Verdun y Ojo de Agua no coincidieron con los patrones de especies de Leishmania sp. de referencia internacional. Se recomienda continuar estos estudios de caracterización molecular del parásito circulante mediante el uso de técnicas más precisas. Los resultados obtenidos en el presente estudio permitieron caracterizar y actualizar datos epidemiológicos de la Leishmaniasis visceral en el estado Carabobo, así como la incorporación de herramientas moleculares para diagnósticas más preciso y oportuno de la misma, esto contribuirá al desarrollo medidas oportunas para el control y prevención de esta parasitosis en áreas endémicas, en beneficio del paciente.