CUANTIFICACIÓN DE LOS NIVELES DE CARGA VIRAL DE SARS-COV-2 POR PCR EN TIEMPO REAL EN INDIVIDUOS REFERIDOS AL INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE “RAFAEL RANGEL”

Resumen

Introducción: COVID-19, infección viral altamente transmisible y patógena causada por el SARS-CoV-2, surgió en China y se extendió por el mundo creando una pandemia. Se ha demostrado que la dinámica viral tiene influencia en el progreso de la enfermedad. Es importante contar con herramientas que permitan evaluar su curso. Por ello, se propone estandarizar la técnica de qRT-PCR para la cuantificación de los niveles de carga viral del SARS-CoV-2. Objetivo: Estandarizar la técnica de qRT-PCR para la cuantificación de los niveles de carga viral del SARS-CoV-2 en pacientes referidos al Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel” (INHRR). Metodología: Se realizó una curva de calibración a partir de un estándar del gen E del SARS-CoV-2 con 108 copias virales/μL, se realizaron diluciones seriadas 1:10 y se establecieron 8 puntos para obtener la función lineal necesaria mediante los métodos estadísticos adecuados. Se cuantificó la carga viral de 230 muestras provenientes del tracto respiratorio superior mediante qRT-PCR, extraídas previamente con el método de perlas magnéticas y/o columnas de sílica gel. Resultados: Se obtuvo una curva estándar de calibración con un coeficiente de correlación (r2 ) de 0,9959 y Eficiencia (E) de 79%. Se correlacionó el Ct obtenido de las muestras con el número de copias virales presentes en ellas, obteniéndose un promedio de carga viral que oscila en el orden de 104 copias virales/μL en sintomáticos y 103 copias virales/μL en asintomáticos. Conclusión: Este trabajo representa el primer reporte de estandarización de una metodología para la cuantificación de los niveles de carga viral del SARS-CoV-2 en muestras del tracto respiratorio superior en Venezuela, para la implementación y uso de una herramienta útil en el monitoreo de los casos de COVID-19. Se observó que los niveles de carga viral en las muestras de estudio presentaban un promedio de carga viral que oscila en el orden de 103 - 104 copias virales/μL