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Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://hdl.handle.net/123456789/8158

Título : Estudio del Efecto del ATP-Mg sobre las Corrientes Del Intercambiador K+/Ca2+ del Eritrocito Humano
Autor : Guerra, Almary V.
Palabras clave : eritrocito humano
célula anucleada
apoptosis clásica
eritrocitos humanos
intracelular
ión
lecho capilar
hipótesis del K+
Fecha de publicación : 21-Jan-2015
Resumen : El eritrocito humano presenta una vida media de 120 días y al ser una célula anucleada, no puede entrar en un proceso de apoptosis clásica. Poco se conoce acerca del proceso de senescencia de los eritrocitos humanos, sin embargo es aceptado que la [Ca2+] intracelular aumenta con la edad de estas células, por lo que se ha planteado que la entrada de este ión asociada al paso por el lecho capilar, estaría relacionado con dicho proceso. En nuestro laboratorio se ha propuesto una hipótesis que explica este proceso, la hipótesis del K+, la cual se fundamenta en dos mecanismos: el canal de K+ dependiente de presión (HEMKCA) y el intercambiador K+/Ca2+. Ambos mecanismos han sido evidenciados en nuestro laboratorio usando la técnica del T.U.G.O. Patch Clamp (The U-Shape Giga Ohm Patch Clamp), en la que se busca simular los fenómenos mecánicos a los cuales está sometido el eritrocito en la microcirculación. La activación del intercambiador K+/Ca2+ presenta una depencia sigmoidea con el voltaje, una estequiometría de 12:1 y una secuencia de permeabilidad: K+ > Rb+ >>> Cs+ y Ca2+ > Ba2+ > > Mg2+. El complejo ATP-Mg es capaz de regular la actividad de distintos mecanismos transportadores, bien sea uniéndose a ellos de forma directa o fosforilándolos por medio de proteínas kinasas, de esta forma se afecta el transporte de iones a través de la membrana y sus concentraciones intracelulares. La morfología de la membrana plasmática puede ser afectada por el ATP intracelular, induciendo cambios en las propiedades de ésta y en las proteínas que se encuentran en la membrana. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la variación de la concentración interna de ATP-Mg2+ sobre la actividad del intercambiador K+/Ca2+: permeabilidad, activación y el desarrollo temporal de la desactivación. Para ésto se emplearon soluciones con una concentración de ATP que varió desde 0 a 4mM, en pasos de 0,5mM. Se empleó la técnica del T.U.G.O. Patch Clamp. Se encontró que las corrientes del intercambiador aumentan en presencia de ATP-Mg2+ de forma dosis-dependiente, presentando un efecto más acentuado en el modo de entrada de K+. No hubo saturación del intercambiador en presencia de 4mM ATP-Mg2+. La permeabilidad del intercambiador aumenta en presencia de ATP-Mg2+ desde un 48% hasta un 200% en el modo de entrada de K+ (efecto dosis dependiente), mientras que en el modo de salida de K+ la permeabilidad aumenta en un 36%. Por otro lado, se observó que el ATP-Mg2+ aumenta el tiempo de desactivación del intercambiador en un 20% en el modo de salida de K+. Estos resultados sugieren la existencia de dos sitios de unión del ATP-Mg2+, uno con una baja afinidad que afecta la activación del mismo y su permeabilidad y otro con una alta afinidad que afecta únicamente la permeabilidad, lo que implica que la activación y la permeabilidad son procesos que se encuentran en dominios distintos del mismo.
URI : http://saber.ucv.ve/jspui/handle/123456789/8158
Aparece en las colecciones: Pregrado

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