Detección de infecciones sencillas y mixtas por Trypanosoma rangeli Y Trypanosoma cruzi en muestras provenientes de vectores de diferentes regiones de Venezuela preservadas en papel FTA

Abstract

Los parásitos Trypanosoma rangeli y Trypanosoma cruzi, son protozoarios de los subgénero Herpetosoma y Schyzotrypanum respectivamente, familia Trypanosomatidae, orden Kinetoplastida, que han sido descrito en gran parte del continente Americano, superponiendo en muchos casos su distribución geográfica; T. cruzi, el agente etiológico de la enfermedad de Chagas, comparte con T. rangeli hospedadores vertebrados e invertebrados. Los hospedadores invertebrados de estos parásitos son hemípteros hematófagos (triatominos), y son capaces de transmitir T. rangeli al vertebrado durante la picadura y T. cruzi por contacto con las heces. Las semejanzas morfológicas y antigénicas entre estos parásitos dificultan los procesos de detección, por lo cual se han desarrollado herramientas que permitan una mejor identificación de estas especies, así como el estudio detallado de las variaciones intra-especifica. T. rangeli ha sido considerado un complejo biológico con un grado significativo de polimorfismo genético, que permite separarlo en sub-grupos (grupos A, B, C y D) de amplia distribución en hospederos vertebrados e invertebrados. Por su parte, en T. cruzi se han descrito dos sub-grupos principales (linajes I y II). Estas muestras de diversidad genética hacen de estas especies un objeto interesante de estudio. De aquí la importancia del análisis del mayor numero de aislados posibles, provenientes de diferentes regiones que permitan establecer las relaciones existentes entre estas sub-poblaciones a nivel biológico y taxonómico. Con la finalidad de evaluar la distribución geográfica de estas especies y las subpoblaciones que se encuentran circulando en vectores triatominos, utilizando ensayos de PCR especie-específicos para T. rangeli y T. cruzi, nos proponemos evaluar la presencia de infecciones sencillas y mixtas en muestras de triatominos de captura y xenodiagnosticos de mamíferos domésticos provenientes de diferentes regiones de Venezuela, recolectadas en papel FTA. En este trabajo se estandarizaron las condiciones de preservación y tratamiento de las muestras preservadas en papel FTA para su utilización en análisis con PCR; la evaluación del nivel de sensibilidad de la técnica mostró una detección de hasta 5 parásitos (0,5parasitos/HL) colocados en un disco de papel FTA de 0,5cm. de diámetro. Con esta metodología se analizaron 84 muestras de triatominos de captura provenientes de 76 triatominos capturados en zonas urbanas y rurales de los estados Sucre, Miranda, Vargas, Aragua y Distrito Capital, de los cuales un 84% pertenece al género Panstrongylus que en su mayoría fueron capturados en zonas urbanas. El 76% de triatominos evaluados resultaron positivos a infecciones por T. cruzi, con prevalencia del linaje TCI (encontrado en el 55% de las muestras infectadas); no se detectaron triatominos infectados por T. rangeli. 71 de las muestras de triatominos capturados fueron analizadas al microscopio de luz, observando tripanosomas en el 21%, mientras que con los análisis por PCR el 76% de estas mismas muestras fueron positivas a T. cruzi. En las muestras provenientes de xenodiagnóstico se detectó la presencia de infección por T. cruzi en 45 muestras (63%), sugiriendo la contaminación de estas durante el proceso de toma.